5015_Fasciola gigantica IgG

96 Tests In vitro diagnostic
Fasciola Gigantica IgG ELISA Kit medical device REF 5015 INTENDED USE Th e
Fasciola gigantica ELISA test is a semi-quantitative enzyme immunoassay for the detection of antibodies to Fasciola, in samples of
human serum or plasma. Th is test is intended to be performed by trained medical technologists only. SUMMARY AND EXPLANATION
Fasciola is a hermaphroditic trematode which causes the zoonotic disease Fascioliasis. Humans become infected with the disease
by ingesting uncooked watercress and other aquatic vegetation on which metacercariae are encysted. Once inside the body, the
metacercariae excyst in the small intestine and migrate into the peritoneal cavity through the intestinal wal . Eventual y, the larvae
enter the bile ducts and mature into adult worms and produce eggs.
Both Fasciola hepatica and Fasciola gigantica infect humans. F. hepatica typical y occurs worldwide in temperate regions while F.
gigantica tend to occur in more tropical areas. Where these regions overlap, Fasciola with characteristics of both hepatica and gigantica have been reported.
Both of NLD’s Fasciola kits have very strong cross reactions with hepatica and gigantica but do use diff erent antigens that are more
reactive with each individual species. Th us, it is recommended that the lab determine the Fasciola species for its’ testing population and
choose that assay. For the region where both species overlap, it may be prudent to use both the hepatica and gigantica assays. PRINCIPLE OF PROCEDURE
Th e microwel s are coated with Fasciola native antigen. During the fi rst incubation with the diluted patients’ sera, any antibodies which
are reactive with the antigen will bind to the coated wel s. Aft er washing to remove the rest of the sample, the Enzyme Conjugate is
added. If antibodies have been bound to the wel s, the Enzyme Conjugate will then bind to these antibodies. Aft er another series of
washes, a chromogen (tetramethylbenzidine or TMB) is added. If the Enzyme Conjugate is present, the peroxidase will catalyze a
reaction that consumes the peroxide and turns the chromogen from clear to blue. Addition of the Stop Solution ends the reaction and
turns the blue color to a bright yellow color. Th e reaction may then be read visual y or with an ELISA reader. MATERIALS PROVIDED Fasciola IgG ELISA Kit
Test Strips Microwells containing Fasciola antigens – 96 test wells in a test strip holder. Foil pouch. Ready to use.
Enzyme Conjugate One (1) bottle containing 13 ml of Protein A conjugated to peroxidase. Red cap. Red solution. Ready to use.
Positive Control One (1) vial containing 2 ml of a surrogate positive. Red cap. Clear solution. Ready to use.
Negative Control One (1) vial containing 2 ml of diluted negative human serum. Blue cap. Clear solution. Ready to use.
Chromogen One (1) bottle containing 13 ml of chromogen tetramethylbenzidine (TMB). Amber cap. Clear solution. Ready to use.
Wash Concentrate (20X) Two (2) bottles containing 25 ml of concentrated buff er and surfactant. White cap. Clear solution. Ready to use.
Dilution Buff er Two (2) bottles containing 30 ml of buff ered protein solution. Clear cap. Clear solution. Ready to use.
Stop Solution One (1) bottle containing 13 ml of 1 M phosphoric acid. Clear cap. Clear solution. Ready to use.
MATERIALS REQUIRED BUT NOT PROVIDED - Micropipette - Reagent grade (DI) water - Graduated Cylinder - Sample Dilution Tubes - Timer - Absorbent Paper SUGGESTED MATERIALS Rev. 2025-06-04 1 Fasciola Gigantica IgG Made in the USA REF 5015
ELISA plate reader with a 450 nm and a 620 - 650 nm fi lter PROPER TEMPERATURE
All incubations are at room temperature (15-25 °C) PRECAUTIONS
Do not deviate from the specifi ed procedures when performing this assay. All specimen dilutions, incubation times/temperatures and
washings have been optimized for the best performance characteristics. Deviations from the specifi ed procedures may aff ect the
sensitivity and specifi city of the assay.
For In Vitro Diagnostic Use Only.
Do not interchange reagents between kits with diff erent lot numbers.
Do not use reagents that are beyond their expiration dates. Expiration dates are on each reagent label. Use of reagents beyond their
expiration dates may aff ect results.
Unused microwells should be stored in the desiccated pouch to protect them from moisture.
Do not use solutions if they precipitate or become cloudy.
Exception: Wash concentrate may precipitate during refrigerated storage but will dissolve upon warming.
Do not add azides to the samples or any of the reagents.
Controls and some reagents contain Th imerosal as a preservative, which may be irritating to skin, eyes and mucous membranes. In
case of contact, fl ush eyes or rinse skin with copious amounts of water.
Do not use serum that may have supported microbial growth or is cloudy due to high lipid content. Samples high in lipids should be clarifi ed before use.
Treat all reagents and samples as potentially infectious materials. Negative control has been tested and found negative for Hepatitis B
surface antigen and for the antibody to HIV be required test methods. Use care to prevent aerosols and decontaminate any spills of samples.
Stop solution is a 5% solution of phosphoric acid in water. If spilled on the skin, wash with copious amounts of water. If acid gets
into the eyes, wash with copious amounts of water and seek medical attention. STORAGE CONDITIONS
Reagents, strips and bottled components should be stored at 2-8 °C
Squeeze bottle containing diluted wash buff er may be stored at room temperature (15-25 °C) PREPARATION
Before use, bring all reagents and samples to room temperature (15-25 °C) and mix.
(20X) Wash Concentrate may precipitate during refrigerated storage but will go back into solution when brought to room
temperature and mixed. Ensure that (20X) Wash Concentrate is completely in solution before diluting to working concentration. To
dilute (20X) wash concentrate to working dilution, remove cap and add contents of one bottle of Wash Concentrate to a squeeze
bottle containing 475 ml of DI water. Swirl to mix. Squeeze bottle should have a narrow tip to optimize washings.
COLLECTION AND PREPARATION OF SAMPLE
Serum or plasma may be stored at 2-8 ºC for up to fi ve days. Sample may be frozen below -20 ºC for extended periods. Freezing
whole blood samples is not advised. Do not heat inactivate samples and avoid repeated freezing and thawing of samples. Sample Preparation
Dilute patient sample 1:100 using the Dilution Buffer (e.g. 1 µl sample and 100 µl dilution buffer). ASSAY PROCEDURE Notes:
Ensure all samples and reagents are at room temperature (15-25°C)
Negative and positive controls are supplied pre-diluted. DO NOT dilute further. Rev. 2025-06-04 2 Fasciola Gigantica IgG Made in the USA REF 5015
1. Break off number of wells needed (three for controls plus number of samples) and place in strip holder.
2. Add 100 µl of the negative control to well #1 and well #2, 100 µl of the positive control to well #3 and 100
µl of the diluted test samples to the remaining wells.
3. Incubate at room temperature for 30 minutes, then wash.*
4. Add 100 µl of Enzyme Conjugate to each well.
5. Incubate at room temperature for 10 minutes, then wash.*
6. Add 100 µl of the Chromogen to each well.
7. Incubate at room temperature for 10 minutes.
8. Add 100 µl of the Stop Solution to each well. Mix contents by gently tapping the side of the strip holder.
9. Read within one hour of adding Stop Solution.
* Washings consist of 5 washings of 300 µl per well for each step with a 30 second dwell time for each wash set. If possible, slap out
excessive wash buff er from the wells against absorbent toweling before addition of the next reagent. Proper and thorough
washing is key to obtaining accurate and reproducible results. READING OF RESULTS
ELISA Reader: Zero reader on air. Set for bichromatic readings at 450/620-650 nm.
INTERPRETATION OF THE TEST – ELISA READER
1 – Calculate the average extinction value by taking the average OD value of the Negative Control.
2 – Add 0.150 to this average extinction value. Th is value is the cut-off value used in the Sample Index Calculation. Example: Negative Control 1 OD = 0.084 Negative Control 2 OD = 0.100
Average is 0.084 + 0.100 = 0.184 / 2 = 0.092 = Average Extinction Value
Cut-off value is the Average Extinction Value + 0.150 (in this example 0.092 + 0.150 = 0.242
3 – Determine the Sample Index by dividing the patients OD value by the Cut-off value. Example: Patient OD value of 1.650 Cut-off value of 0.242 1.650 / 0.242 = 6.818
4 – Evaluate the Sample Index.
Negative = less than 0.9 Sample Index Equivocal = 0.9 to 1.1 Positive = greater than 1.1 QUALITY CONTROL
Th e use of controls allows validation of kit stability. Th e kit should not be used if any of the controls are out of range. Made in the USA Rev. 2025-06-04 3 Fasciola Gigantica IgG REF 5015
Expected values for the controls are:
Negative - 0.0 to 0.2 OD units
Positive - 0.5 OD units and above TROUBLESHOOTING
Negative control has excessive color after development. Reason: inadequete washing.
Correction: wash more vigorously. Remove excessive liquid from the wells by tapping against an absorbant towel. Do not allow test wells to dry out. TEST LIMITATIONS
Diagnosis of Fasciola infection should not be made solely based on results of the ELISA Fasciola test alone, but in conjunction with
other clinical signs and symptoms and other laboratory fi ndings.
Epidemiologic factors, clinical fi ndings, exposure to endemic regions, and other laboratory results should be considered when making a diagnosis.
PERFORMANCE DATA EXPECTED VALUES
Th e number of antibody positive subjects in a population depends on two factors: disease prevalence and clinical criteria used to select
the tested population. Because very few positives should be seen in a randomly screened population in a non-endemic area, most
serology tests are not specifi c enough to screen non-endemic populations. Even in an endemic region, serology screening oft en yields
many false positives if used to randomly screen patients. Serology tests are useful to test patients in an endemic region with signs and
symptoms consistent with the disease. Performance Characteristics
Study #1 – Versus Southeast Asia Derived Samples Specificity: 41/45 (91%) Sensitivity: 12/12 (100%) REFERENCES 1.
Bruckner, D., Garcia, L. Diagnostic Medical Parasitology. 2nd Edition. American Society for Microbiology, 1993. pp. 309-317. 2.
Sampaio Silvia, M. L. et. al. “Antigentic Components of Excretory-Secretory Products of Adult Fasciola hepatica Recognized
in Human Infections”. Am J Trop Med Hyg. Vol. 54 (Sup 3), 1996, pp. 146-148. 3.
O’Neil , S. et. al. “Short Report: Immunodiagnosis of Human Fascioliasis using Recombinant Fasciola hepatica Cathepsin L1
Cysteine Proteinase”. Am J Trop Med Hyg. Vol. 60 (Sup 5), 1999, pp. 749-751. 4.
Hil yer, G. Fascioliasis and Fasciolopsiasis. Chapter 90, pp. 856-861. Manufacturer New Life Diagnostics, Inc. 5909 Sea Lion Pl, Suite A Carlsbad, CA 92010 USA info@newlifediagnostics.com www.newlifediagnostics.com Rev. 2025-06-04 Fasciola Gigantica IgG 4 Made in the USA REF 5015
Fasciola Gigantica IgG ELISA Kit Mã 5015
MỤC ĐÍCH SỬ DỤNG
Fasciola gigantica ELISA Dùng để xác định bán định lượng kháng thể IgG kháng Fasciola bằng phương pháp Hấp thụ miễn dịch
liên kết enzyme (ELISA), trong mẫu huyết thanh hoặc huyết tương người. Xét nghiệm này chỉ được thực hiện bởi các kỹ thuật
viên y tế đã qua đào tạo.
TÓM TẮT VÀ GIẢI THÍCH
Fasciola là một loài sán lá lưỡng tính gây ra bệnh sán lá gan lớn – một bệnh lây từ động vật sang người. Con người nhiễm bệnh khi
ăn phải rau cải xoong hoặc các loại thực vật thủy sinh khác còn sống có mang ấu trùng có vỏ bọc (metacercariae). Khi vào cơ thể,
các metacercariae sẽ thoát vỏ ở ruột non và di chuyển vào khoang bụng thông qua thành ruột. Cuối cùng, ấu trùng đi vào ống mật,
phát triển thành sán trưởng thành và bắt đầu sinh sản, tạo ra trứng.
Cả Fasciola hepatica và Fasciola gigantica đều có thể gây nhiễm ở người. F. hepatica thường gặp trên toàn thế giới ở các vùng ôn
đới, trong khi F. gigantica phổ biến hơn ở các khu vực nhiệt đới. Tại những nơi hai vùng này giao nhau, người ta đã ghi nhận các cá
thể Fasciola mang đặc điểm lai giữa hepatica và gigantica.
Cả hai bộ kit Fasciola của NLD đều có phản ứng chéo rất mạnh với cả hepatica và gigantica, tuy nhiên chúng sử dụng các kháng
nguyên khác nhau có độ đặc hiệu cao hơn đối với từng loài riêng biệt. Do đó, phòng xét nghiệm nên xác định loài Fasciola phổ biến
trong nhóm dân số mà mình đang xét nghiệm, từ đó chọn bộ kit phù hợp. Ở những vùng có sự phân bố chồng lắp của cả hai loài,
nên cân nhắc sử dụng đồng thời cả hai bộ kit hepatica và gigantica.
NGUYÊN TẮC XÉT NGHIỆM
Các vi giếng được ủ với kháng nguyên Fasciola tự nhiên. Trong giai đoạn ủ đầu tiên, các kháng thể có trong huyết thanh của bệnh
nhân sẽ gắn với kháng nguyên trong giếng thử. Giai đoạn ủ tiếp theo cho phép phức hợp enzym gắn vào phức hợp kháng nguyên–
kháng thể. Sau vài lần rửa để loại bỏ enzym không gắn kết, một chất nền được thêm vào. Chất này sẽ phát triển màu xanh khi có
mặt của phức hợp enzym và peroxide. Dung dịch dừng phản ứng được thêm vào sau đó sẽ kết thúc phản ứng, làm cho màu xanh
của phản ứng chuyển thành màu vàng. Phản ứng có thể đọc bằng mắt thường hoặc máy đọc ELISA.
NGUYÊN LIỆU ĐƯỢC CUNG CẤP
Bộ dụng cụ ELISA xét nghiệm huyết thanh Fasciola IgG
Dãy giếng Vi giếng chứa kháng nguyên Fasciola– 96 giếng thử trong một khung giữ. Túi nhôm. Sẵn sàng sử dụng.
Enzyme liên hợp Một (1) lọ chứa 13 ml Protein-A liên hợp với peroxidase. Nắp đỏ. Dung dịch đỏ. Sẵn sàng sử dụng.
Chứng dương Một (1) lọ chứa 2 ml chất chứng dương đại diện. Nắp đỏ. Dung dịch trong suốt. Sẵn sàng sử dụng.
Chứng âm Một (1) lọ chứa 2 ml huyết thanh người âm tính đã được pha loãng. Nắp xanh. Dung dịch trong suốt. Sẵn sàng sử dụng.
Cơ chất/Chất sinh màu Một (1) chai chứa 13 ml cơ chất Tetramethylbenzidine (TMB). Nắp hổ phách. Dung dịch trong suốt. Sẵn sàng sử dụng.
Dung dịch rửa đậm đặc (20X) Hai (2) chai chứa 25 ml dung dịch đệm đậm đặc và chất hoạt động bề mặt. Nắp trắng. Dung dịch
trong suốt. Sẵn sàng sử dụng.
Đệm pha loãng Hai (2) chai chứa 30 ml dung dịch protein đệm. Nắp trong. Dung dịch trong suốt. Sẵn sàng sử dụng.
Dung dịch dừng Một (1) chai chứa 13ml acid Phosphoric 1M. Nắp trong. Dung dịch trong suốt. Sẵn sàng sử dụng.
VẬT LIỆU CẦN NHƯNG KHÔNG ĐƯỢC CUNG CẤP -Pipettes
-Bình bóp để rửa dải giếng (nên dùng đầu hẹp) -Nước và ống đong -Ống pha loãng mẫu -Giấy thấm
VẬT LIỆU ĐƯỢC ĐỀ NGHỊ Fasciola Gigantica IgG Sản xuất ở Mỹ Rev. 2025-04-14 1 REF 5015
Máy đọc ELISA với bộ lọc 450nm và bộ lọc 620 – 650nm (tuỳ chọn nếu kết quả được đọc trực quan)
NHIỆT ĐỘ THÍCH HỢP
Tất cả các bước ủ đều được thực hiện ở nhiệt độ phòng (15–25°C). CẨN TRỌNG
Không được thay đổi các quy trình đã được quy định khi thực hiện xét nghiệm này. Tất cả các bước pha loãng mẫu, thời gian/nhiệt
độ ủ và quy trình rửa đã được tối ưu hóa để đạt hiệu suất tốt nhất. Bất kỳ sự sai lệch nào so với quy trình đã định có thể ảnh hưởng
đến độ nhạy và độ đặc hiệu của xét nghiệm.
Chỉ sử dụng trong chẩn đoán In Vitro.
Không được hoán đổi thuốc thử giữa các bộ kit có số lô khác nhau.
Không sử dụng thuốc thử đã quá hạn sử dụng. Ngày hết hạn được ghi trên nhãn của từng thuốc thử. Việc sử dụng thuốc thử quá
hạn có thể ảnh hưởng đến kết quả xét nghiệm.
Các giếng vi thể chưa sử dụng cần được bảo quản trong túi hút ẩm để tránh ẩm.
Không sử dụng dung dịch nếu có hiện tượng kết tủa hoặc trở nên đục.
Ngoại lệ: Dung dịch cô đặc để rửa có thể kết tinh khi bảo quản lạnh, nhưng sẽ tan trở lại khi làm ấm.
Không thêm azide vào mẫu hoặc bất kỳ thuốc thử nào.
Các mẫu chứng và một số thuốc thử có chứa thimerosal làm chất bảo quản, có thể gây kích ứng da, mắt và niêm mạc. Nếu tiếp xúc,
cần rửa mắt hoặc vùng da tiếp xúc bằng nhiều nước.
Không sử dụng huyết thanh có thể đã bị nhiễm vi sinh hoặc bị đục do hàm lượng lipid cao. Các mẫu có nhiều lipid cần được làm
trong trước khi sử dụng.
Xử lý tất cả các thuốc thử và mẫu như những vật liệu có khả năng lây nhiễm. Mẫu chứng dương đã được kiểm tra và cho kết quả âm
tính với kháng nguyên bề mặt viêm gan B và kháng thể HIV theo các phương pháp yêu cầu. Cần cẩn thận để tránh tạo khí dung và
phải khử nhiễm bất kỳ chỗ tràn nào của mẫu.
Dung dịch dừng phản ứng là dung dịch axit phosphoric 5% trong nước. Nếu dính vào da, rửa bằng nhiều nước. Nếu axit vào mắt, cần
rửa kỹ bằng nước và tìm kiếm sự trợ giúp y tế.
ĐIỀU KIỆN BẢO QUẢN
Thuốc thử, dãy giếng và thành phần được đóng chai nên được bảo quản tại 2-8 °C
Bình bóp chứa dung dịch đệm rửa được pha loãng nên được bảo quản tại nhiệt độ phòng. CHUẨN BỊ
Trước khi sử dụng, đưa tất cả thuốc thử và mẫu về nhiệt độ phòng (15–25 °C) và trộn đều.
Dung dịch cô đặc để rửa (20X) có thể kết tinh khi bảo quản lạnh, nhưng sẽ tan trở lại khi được đưa về nhiệt độ phòng và khuấy
trộn. Đảm bảo rằng dung dịch cô đặc (20X) đã hoàn toàn tan trước khi pha loãng đến nồng độ sử dụng.
Để pha loãng dung dịch rửa (20X) đến nồng độ sử dụng, mở nắp và đổ toàn bộ dung dịch trong một chai cô đặc vào chai bóp
chứa 475 ml nước cất khử ion (DI water). Lắc xoáy nhẹ để trộn đều. Chai bóp nên có đầu nhỏ để tối ưu hóa quá trình rửa. THU VÀ XỬ LÝ MẪU
Huyết thanh hoặc huyết tương có thể được bảo quản ở nhiệt độ 2–8 oC trong tối đa năm ngày. Để máu đông lại rồi tách huyết
thanh. Nếu không sử dụng ngay, cần đông lạnh mẫu ở -20 oC hoặc thấp hơn.
Không làm nóng bất hoạt huyết thanh và tránh đông lạnh và rã đông mẫu nhiều lần. Chuẩn bị mẫu
QUY TRÌNH XÉT NGHIỆM Lưu ý:
Đảm bảo tất cả các mẫu và thuốc thử đều ở nhiệt độ phòng (15–25°C).
Mẫu chứng âm và chứng dương đã được pha loãng sẵn. KHÔNG pha loãng thêm. 1.
Bẻ số lượng giếng cần dùng (ba giếng đối chứng cộng với số lượng mẫu) và đặt vào khay 2.
Pha loãng huyết thanh theo tỷ lệ 1:100 sử dụng dung dịch pha loãng (ví dụ: 1 µl huyết thanh và 100 µl dung dịch pha loãng). 3.
Thêm 100 µl chứng âm vào giếng #1 va #2, 100 µl chứng dương vào giếng #3 và 100 µl mẫu đã được pha loãng
vào các giếng còn lại. Ghi chú: Chứng âm và chứng dương đã được pha loãng. Không pha loãng thêm 4.
Ủ ở nhiệt độ phòng (15-25°C) trong 30 phút, rồi rửa. 5.
Thêm 100 µl Enzyme liên hợp vào mỗi giếng. 6.
Ủ ở nhiệt độ phòng trong 10 phút, rồi rửa. 7.
Thêm 100 µlcơ chất vào mỗi giếng. Fasciola Gigantica IgG Sản xuất ở Mỹ Rev. 2025-04-14 2 REF 5015 8.
Ủ ở nhiệt độ phòng trong 10 phút. 9.
Thêm 100 µl dung dịch dừng và trộn bằng cách gõ vào khung giữ. Trộn các giếng bằng cách nhẹ nhàng gõ vào
cạnh của giá đỡ dải với ngón tay trỏ trong khoảng 15 giây. 10.
Đọc kết quả trong vòng một giờ sau khi thêm dung dịch dừng phản ứng.
* Quá trình rửa bao gồm 5 lần rửa, mỗi lần sử dụng 300 µl cho mỗi giếng, với thời gian ngâm 30 giây cho mỗi lần rửa.
Nếu có thể, hãy dốc ngược các giếng lên khăn thấm để loại bỏ dung dịch đệm rửa dư thừa trước khi thêm thuốc thử tiếp theo.
Việc rửa đúng cách và kỹ lưỡng là yếu tố then chốt để thu được kết quả chính xác và có thể lặp lại. ĐỌC KẾT QUẢ
Máy đọc ELISA: đọc OD không khí bằng máy. Thiết lập đọc ở 450/620-650 nm.
DIỄN GIẢI KẾT QUẢ XÉT NGHIỆM – MÁY ĐỌC ELISA
1 – Tính giá trị hấp thụ trung bình bằng cách lấy giá trị OD trung bình của mẫu chứng âm.
2 – Thêm 0.150 vào giá trị hấp thụ trung bình. Giá trị này là khoảng cut-off được sử dụng để tính toán Chỉ số mẫu (Sample Index). Ví dụ: Negative Control 1 OD = 0,084 Negative Control 2 OD = 0,100
Trung bình 0,084 + 0,100 = 0,184 / 2 = 0,092 = Giá trị hấp thụ trung bình
Giá trị Cut-off là Giá trị hấp thụ trung bình + 0,150 (trong ví dụ này 0,092 + 0,150 = 0,242)
3 – Xác định Chỉ số mẫu của bệnh nhân bằng cách chia OD bệnh nhân với giá trị Cut-off. Ví dụ:
Giá trị OD bệnh nhân: 1,650 Giá trị Cut-off: 0,242
Chỉ số mẫu: 1,650 / 0,242 = 6,818
4 – Đánh giá Chỉ số mẫu (Sample Index).
Âm tính = thấp hơn 0,9 Chỉ số mẫu Nghi ngờ = 0,9 đến 1,1 Dương tính = lớn hơn 1,1
KIỂM SOÁT CHẤT LƯỢNG
Việc sử dụng các chứng nhằm đánh giá sự ổn định của kit. Kit không nên sử dụng nếu các chứng nằm ngoài phạm vi. Giá trị dự kiến cho các chứng: Chứng âm - 0,0 to 0,2 đơn vị OD Chứng dương-
0,5 OD giá trị OD trở lên XỬ LÝ SỰ CỐ
Chứng âm có màu sắc đậm.
Nguyên nhân: rửa không đủ.
Biện pháp: rửa mạnh hơn. Loại bỏ hoàn toàn chất lỏng từ các giếng bằng cách đập nhẹ vào một chiếc khăn thấm nước. Không cho giếng thử khô.
GIỚI HẠN XÉT NGHIỆM
Chẩn đoán nhiễm Fasciola không nên chỉ dựa vào kết quả của xét nghiệm ELISA Fasciola, mà cần kết hợp với các dấu hiệu lâm sàng,
triệu chứng và các kết quả xét nghiệm khác.
Các yếu tố dịch tễ, biểu hiện lâm sàng, tiền sử phơi nhiễm tại vùng lưu hành và các kết quả xét nghiệm bổ sung cũng cần được xem
xét khi đưa ra chẩn đoán.
DỮ LIỆU VỀ HIỆU SUẤT – CÁC GIÁ TRỊ DỰ KIẾN
Số lượng cá thể dương tính với kháng thể trong một quần thể phụ thuộc vào hai yếu tố: tỷ lệ lưu hành bệnh và tiêu chí lâm sàng
được sử dụng để chọn đối tượng xét nghiệm. Vì trong một quần thể được sàng lọc ngẫu nhiên tại khu vực không lưu hành bệnh thì
rất ít trường hợp dương tính, nên hầu hết các xét nghiệm huyết thanh học không đủ độ đặc hiệu để sàng lọc cho những vùng này. Fasciola Gigantica IgG Sản xuất ở Mỹ Rev. 2025-04-14 3 REF 5015
Ngay cả ở khu vực lưu hành bệnh, việc sàng lọc huyết thanh học ngẫu nhiên thường dẫn đến nhiều kết quả dương tính giả. Xét
nghiệm huyết thanh chỉ thực sự hữu ích khi được sử dụng để kiểm tra những bệnh nhân tại vùng lưu hành có các dấu hiệu và triệu
chứng phù hợp với bệnh. Các đặc tính hiệu năng
Nghiên cứu số 1 – So sánh với mẫu bệnh phẩm có nguồn gốc từ Đông Nam Á
Mẫu âm tính: 41/45 (Độ đặc hiệu 91%)
Mẫu dương tính: 12/12 (Độ nhạy 100%) TÀI LIỆU THAM KHẢO
1. Bruckner, D., Garcia, L. Diagnostic Medical Parasitology. 2nd Edition. American Society for Microbiology, 1993. pp. 309-317.
2. Sampaio Silvia, M. L. et. al. “Antigentic Components of Excretory-Secretory Products of Adult Fasciola hepatica Recognized
in Human Infections”. Am J Trop Med Hyg. Vol. 54 (Sup 3), 1996, pp. 146-148.
3. O’Neil , S. et. al. “Short Report: Immunodiagnosis of Human Fascioliasis using Recombinant Fasciola hepatica Cathepsin L1
Cysteine Proteinase”. Am J Trop Med Hyg. Vol. 60 (Sup 5), 1999, pp. 749-751.
4. Hil yer, G. Fascioliasis and Fasciolopsiasis. Chapter 90, pp. 856-861. Manufacturer New Life Diagnostics, Inc. 5909Sea Lion Pl,SuiteA Carlsbad, CA92010 USA info@newlifediagnostics.com www.newlifediagnostics.com Fasciola Gigantica IgG Sản xuất ở Mỹ Rev. 2025-04-14 4 REF 5015
Document Outline

• 1. Bẻ số lượng giếng cần dùng (ba giếng đố
• 2. Pha loãng huyết thanh theo tỷ lệ 1:100
• 3. Thêm 100 µl chứng âm vào giếng #1 va #2
• 4. Ủ ở nhiệt độ phòng (15-25°C) trong 30 p
• 5. Thêm 100 µl Enzyme liên hợp vào mỗi giế
• 6. Ủ ở nhiệt độ phòng trong 10 phút, rồi r
• 7. Thêm 100 µlcơ chất vào mỗi giếng.
• 8. Ủ ở nhiệt độ phòng trong 10 phút.
• 9. Thêm 100 µl dung dịch dừng và trộn bằng
• 10. Đọc kết quả trong vòng một giờ sau khi th