lOMoARcPSD|40651217

BÁO CÁO THỰC HÀNH

Bài: XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG VITAMIN C TRONG RAU QUẢ

(Metrohm – Application Bulletin, No.98/3 e ; AOAC 967.21)

Ưu nhược điểm của phương pháp Ưu điểm:

• Chuẩn độ được các dung dịch có màu, và độ chính xác cao.
• So với phương pháp điện thế kế trực tiếp, phương pháp này không bị cản trở bởi điện thếnối và hệ số hoạt độ.
• So với phương pháp chuẩn độ thể tích cổ điển (sử dụng chất chỉ thị), phương pháp nàykhông mắc sai số chỉ thị, có thể sử dụng khi dung dịch có màu, nồng độ chất phân tích thấp. Ứng dụng rộng rãi trong trong kiểm tra chất lượn nước cũng như thực phẩm.

Nhược điểm:

• Mất nhiều thời gian do cần nhiều điểm để vẽ đường cong chuẩn độ, có thể khắc phụcđược bằng thiết bị chuẩn độ tự động.

Giới thiệu phương pháp chuẩn độ điện thế

• Là một phương pháp phân tích mà việc xác định điểm tương đương của quá trình chuẩnđộ được thực hiện bằng cách đo điện thế của dung dịch phân tích. Tại gần điểm tương đương xảy ra sư thay đổi đột ngột của thế điện cực chỉ thị, nhờ đó xác định được điểm tương đương.
• Việc xác định điểm tương đương theo phương pháp chuẩn độ điện thế chỉ được thựchiện khi có ít nhất một cấu tử tham gia phản ứng chuẩn độ quá trình điện cực.

Để tiến hành phương pháp chuẩn độ điện thế, người ta lắp một mạch đo gồm điện cực vào becher chứa dung dịch phân tích.

II. Nguyên tắc

Có 2 cách:

- Cách 1: Vitamin C (acid ascorbic) và các dạng muối hay este của acid ascorbic trong các mẫu rau quả sẽ được chiết với acid oxalic, sau đó tiến hành chuẩn độ bằng phương pháp chuẩn độ điện thế với chất chuẩn là 2,6 – dicholophenol indophenol (DPIP). Nguyên tắc của phương pháp là dựa vào phản ứng oxi hoá acid ascorbic thành acid dehydroascorbic bởi 2,6 – dicholophenol indophenol trong môi trường acid .

Phương trình phản ứng:

H2C6 H6O6+HC12 H6C12O2N →C6 H6O6+HC12H8C12O2 N

- Cách 2: Acid ascobic được chuẩn độ bằng chất chuẩn là iod. Nguyên tắc của phương pháp là dựa vào phản ứng oxi hóa acid ascobic thành acid dehydroascobic bởi iod trong môi trường acid.

Phương trình phản ứng:

I₂+ I^-  I₃^-

cC6H8O6  I₃^-  C6H6O6  3I^  2H^

1. Hóa chất, dụng cụ và thiết bị

3.1. Hóa chất

1. Tiến hành thí nghiệm

. Chuẩn bị mẫu

4.1

Cân 9.8374g mẫu

đã cắt nhỏ với dao

không gỉ

Cho vào cối sứ 10mL dung

dịch acid oxalic, nghiền nhỏ

và cho vào becher 100mL

Thực hiện 3 lần sau đó gộp tất cả vào bình định

mức 100ml, tráng cốc và cối chày sứ bằng

ml dung dịch acid oxalic và định mức đến

10

vạch.

Để yên 10 phút

cho acid oxalic

trong mẫu hòa

tan hết

Lọc bằng giấy

lọc băng vàng

(

Bỏ nước lọc

đầu)

Dung dịch lọc

4.2. Phân tích mẫu bằng phương pháp chuẩn độ với Iod

4.2.1. Xác định nồng độ chính xác của Na₂S₂O₃ bằng K₂Cr₂O₇ 0,1N

10

ml K

2

Cr

2

O

7

0.1

N

5

mL KI 10%

2

mL H

2

SO

4

4N

10

mL nước cất

Đậy kín để trong tối 10 phút

Na

2

S

2

O

3

0.1N

Chuẩn độ Na

2

S

2

O

3

0.1N đến khi

dung dịch có màu vàng rơm

Cho 3 giọt chỉ thị hồ

tinh bột (dung dịch

xuất hiện màu xanh

tím)

Tiếp tục chuẩn độ đến

khi mất màu xanh tím

Ghi nhận

V

Na

2

S

2

O

3

)

(

mL

► Thực hiện 3 lần thí nghiệm. Tính thể tích Na₂S₂O₃ trung bình, suy ra nồng độ đương lượng Na₂S₂O₃

• Phản ứng thế:

3+¿+3 I +7 H ¿ 2 2 Cr_2O2₇−¿+6I−dư¿+14H^{+¿→Cr ¿}¿¿O

• Phản ứng chuẩn độ:

2−¿¿

−¿+2S2O23−¿↔2I−¿+S4O6 ¿¿¿

I₃

4.2.2. Xác định nồng độ chính xác của dung dịch Iod bằng dung dịch chuẩn Na₂S₂O₃

-

5mL dung dịch iod

-

10mL nước cất

-

5mL đệm acetat

-

5 giọt chỉ thị hồ tinh bột, lắc đều-

Chuẩn bằng Na

2

S

2

O3 đến khi dung dịch

mất màu xanh

Na

2

S

2

O

3

► Thực hiện 3 lần thí nghiệm. Tính thể tích Na₂S₂O₃ trung bình, suy ra nồng độ đương lượng I₂

Phản ứng chuẩn độ : I + 2S O ^2- 2I^- + S O ^2-

2 2 34 6

4.2.3. Xác định hàm lượng Vitamin C (C₆H₈O₆) trong mẫu bằng dung dịch Iod

-

10mL mẫu

-

10mL nước cất

-

15mL acid oxalic, 1mL dung dịch CH

3

COONa 10%

-

Chuẩn độ bằng dung dịch iod đến khi dung dịch có màu

xanh tím.

Dung dịch Iod

Nồng độ Vitamin C trong mẫu được xác định như sau:

6 8 6 CN ×V mL)I2 0.0954×V mLiod

CNC H O =( V mLC6H8O6 = 10

4.3. Xác định hàm lượng Vitamin C trong mẫu bằng DPIP

4.3.1. Hiệu chuẩn dung dịch 2,6-Dicholophenol Indophenol bằng dung dịch Vitamin C

-

10mL dung dịch chuẩn Vitamin C

-

10mL nước cất

-

15mL dung dịch acid oxalic

-

1mL dung dịch CH3COONa 10%

Dung dịch DPIP

Điểm dừng chuẩn độ: Dung dịch chuyển từ màu xanh sang màu hồng.

Ta có:

(C

CDPIPN = _N ×VmL^mL)_C6 H₈O₆ =0,0864mL×10

V DPIP V DPIP

4.3.2 Xác định vitamin C trong mẫu

• Lấy 10mL dung dịch lọc cho vào erlen 250mL
• Thêm 10mL nước, 15mL acid oxalic, 1mL dung dịch CH₃COONa 10%
• Cho cá từ vào và khuấy đều dung dịch, nhúng hệ điện cực, hiệu chỉnh thông số máy
• Nhấn start, theo dõi kết quả chuẩn độ- Cài đặt các thông số:

Kết quả v Lần 1:

Ta có:

1.00mL (DPIP) là 0.0010M

Vậy 7.00 mL (DPIP) là 0.0070M Và:

1.00mL (DPIP) = 0.001 mol/L tương ứng 0.1760 mg Vitamin C

Suy ra 0.0070M tương ứng 1.2320 mg vitamin C Hàm lượng vitamin C trong mẫu (mg_{Vitamin C} /100g _mẫu )

mgVitaminC V bđm 100

( 100g_mẫu )=C1× V hút × mmẫu

Trong đó : C₁ là hàm lượng Vitamin C (mg)

mg_VitaminC 100mg

()=1.2320× × =125.2360( ) 100g_mẫu 10 9.8374 100g

VI. Trả lời câu hỏi

6.1. Nêu vai trò các hóa chất đã sử dụng trong quy trình. Ngoài chất oxi hóa là DPIP ta còn có thể sử dụng chất oxi hóa nào khác để xác định acid ascobic không? Nêu nguyên tắc xác định acid ascobic bằng chất oxi hóa này.

Ngoài chất oxi hóa là DPIP ta có thể dung dung dịch I₂

Phương pháp Iod : Acid ascorbic được chuẩn độ bằng chất chuẩn là iod, nguyên tắc phương pháp là dựa vào phản ứng oxi hóa acid ascorbic thành acid dehydroascorbic bởi iod trong môi trường acid - Phương trình phản ứng :

I₂+ I^-  I₃C6H8O6  I₃^-  C6H6O6  3I^  2H

6.2. Nếu trong mẫu có chứa acid dehydro ascorbic thì phải xử lý như thế nào? - Ta cần xử lý ngay bằng cách thêm vài giọt axit oxalic và dung dịch iod đã pha trong KI để chuyển về acid ascorbic rồi đem đi xác định acid ascorbic trong mẫu như bình thường.